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Chrono-log血小板試劑操作及結果判定解讀

發布時間: 2022-09-22  點擊次數: 788次
   Chrono-log血小板試劑在組成上包括一個微孔板;低離子強度溶液;陽性質控,包含血小板特異性抗體;陰性質控,不包含血小板特異性抗體;抗IgG:對人IgG有特異性的鼠單克隆抗體。本試劑用于進行血小板抗體檢測。
  對于血小板的抗體篩檢可將機采三人份新鮮O型血小板血漿混合均勻,用生理鹽水調整血小板濃度為100-200*109個/L,將血小板加入反應板孔中央,每孔50µl(注意:移液器槍尖不要觸碰反應板底部和周邊)。
  具體操作流程如下:
  1.50g離心5min。用洗液洗滌反應板3次,每次靜止放置半分鐘,以除去未與反應板上包被的血小板單克隆抗體結合的血小板。
  2.向每個反應孔中加入2滴(100µl)低離子介質,并向相應的孔中分別加入1滴(50µl)待檢患者血清(血漿)、陰性、陽性對照。
  3.37℃水浴孵育30min。用洗液洗滌反應板5次(方法同上)。
  4.立即加入1滴(50µl)抗人IgG試劑和1滴(50µl)指示細胞,振動混勻。
  5.200g離心5min。
  6.肉眼判讀結果。將機采三人份新鮮O型血小板血漿混合均勻,用生理鹽水調整血小板濃度為100-200*109個/L。同時將供者和受者富含血小板血漿3000rpm 5min離心,使血漿和血小板分離,移出上層血漿至另一試管中備用,用生理鹽水將血小板調整至上述濃度。將血小板分別加入標記好的反應板孔中央,每孔50µl。
  7.50g離心5min。用洗液(蒸餾水30倍稀釋)洗滌反應板3次,每次靜止放置半分鐘,以除去未與反應板上包被的血小板單克隆抗體結合的血小板。向每個反應孔中加入2滴(100µl)低離子介質,并向相應的孔中分別加入1滴(50µl)供受者血漿陰性、陽性對照。
  8.37℃水浴孵育30min。用洗液洗滌反應板5次(方法同上)。立即加入1滴(50µl)抗人IgG試劑和1滴(50µl)指示細胞,振動混勻。
  9.200g離心5min。肉眼判讀結果。
  10.實驗結果判定方法:
  ①陽性結果:指示細胞在反應板底部平鋪,形成細胞層;
  ②陰性結果:指示細胞在反應板底部中央形成細胞聚集。